不同因素对血液凝固的影响

不同因素对血液凝固的影响

摘要 【目的】通过实验了解血液凝固的基本过程及了解不同因素对血液凝固的影响。【方法】通过记录不同因素作用于血液后凝固的时间的长短来判断不同因素对血液凝固的影响。【结果】各组凝血时间依次为：1号（生理盐水）1121秒， 2号（室温230C）1350秒，3号（冰块）>6552秒，4号（肺组织浸液）23秒，5号（棉花）407秒，6号（石蜡油涂管）5569秒 ，7号（草酸钾）>7200秒，8号（肝素）>7200秒。经竹签搅拌后的小烧杯中的血液无凝集现象。【结论】血液凝固受接触面、温度、Ca2﹢等理化因素的影响，血液接触面粗糙，能加速血液凝固，而血液接触面光滑，降低温度则使血凝减慢，此外加肝素等抗凝剂，加草酸钾除去血液中的Ca2﹢等可延缓血液凝固。 关键词： 不同因素；血液；凝固 Abstract：【Objective】through the experiment understand the basic process of blood clots and understanding the different factors on the influence of blood clots.【Method】through the records in the role of different factors of blood coagulation the length of time to judge different factors influence of blood clots.【Aesult】each clotting time is as follows: 1 (saline) 1121 seconds, no. 2 (room temperature 230C) 1350 seconds, no. 3 (ice) > 6552 seconds, no. 4 (lung tissue soaking liquid) 23 seconds, 5 (cotton) 407 seconds, 6 (paraffin oil applied pipe) 5569 seconds, 7 (oxalic acid potassium) > 72 seconds, 8 (heparin) > 72 seconds. The small beaker stir sticks after the blood without agglutinate phenomenon.【Conclusion】blood clots interface, temperature, by Ca2 ﹢ chemical factors, such as rough surfaces, can accelerate blood clotting, and blood interface smooth, reduce temperature makes blood clots slows, besides add heparin anticoagulation, plus oxaliplatin as Ca2﹢remove blood potassium etc can delay the blood coagulation. Keyword：different factors; Blood; solidification

引言 血液凝固过程是由许多凝血因子参加的酶促反应。根据血液凝固过程中凝血酶原激活 的途径不同，可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。内源性凝血是指参与凝血的那些因子全部存在于血浆中；外源性凝血是指在组织因子参与下的凝血过程。本实验采用家兔颈动脉放血取血，血液几乎未与组织因子接触。因此凝血过程主要是内源性凝血系统的作用。肺组织浸液中含有丰富的组织因子，加入试管可观察外源性凝血系统的作用。 1. 材料和方法： 1.1实验动物：家兔

1.2实验仪器：秒表，试管，试管架，家兔固定架，注射器，手术器材。

1.3实验药品和试剂：生理盐水，冰块，肺组织浸液，液体石蜡，草酸钾，肝素（8U），少量棉花。

1.4麻醉固定：用 200g/L 的氨基甲酸乙酯按 5ml/kg 体重剂量给家兔耳缘 静脉注射麻醉，将家兔仰卧位固定于固定架上。

1.5手术操作：切开颈部皮肤，分离出左颈总动脉，结扎左颈总动脉远心段， 用止血夹夹住近心段，进行左颈总动脉插管。 1.6试管处理：1号试管滴加生理盐水0.1ml，2号试管作为正常对照组置于室温不做任何处理，3号试管置于冰块中，4号试管滴加肺组织浸液0.1ml，5号试管放入少量棉花，6号试管均匀涂液体石蜡，7号滴加草酸钾溶液0.1ml，8号试管滴加肝素0.1ml。 1.7实验观察

1.7.1放开动脉夹，向1～8试管每管加入血液2ml，立即用秒表计时，每隔15s将试管倾斜一次，观察血液是否凝固，至血液成为凝胶状，记下所经历时间。

1.7.2将多余的血盛于两个小烧杯中，并不断用竹签搅动其中一烧杯中的血液直至纤维蛋白形成。置于一段时间后，观察比较两烧杯的血液凝固状态。 2.结果：本次实验共包括8组，其统计结果如下

表1. 血液凝固和影响因素

试管

编号

每 管 加 2ml

1 2 3 4 5 6 7 8

小烧杯放血10ml 小烧杯放血10ml

影响因素 加生理盐水 室温23 置于冰槽中 加肺组织浸液 少许棉花 石蜡油涂管壁 加草酸钾 加肝素

放血10ml于烧杯中不断用竹签搅拌，2-3min后用水

冲竹签后观察之 不经任何处理（对照）

凝血时间(s) 1121 1350 6552 23 407 5569 >7200 >7200 不凝 1000

3.讨论：

3.1血液凝固时间1号试管(NS)< 2号试管。血液稀释后凝血功能与血液稀释程度相关,生理盐水占 20 %加快了血液凝固的进程,30 %、40 % 稀释的凝血功能未受影响,50 %稀释的血液凝固能力开始减弱,60 %稀释的血液凝固能力受到严重影响[1]。其可能的原因是：①稀释破坏了凝血酶与抗凝血酶的动态平衡,相较于凝血酶而言,抗凝血酶的活性更容易受到血液稀释的影响, 因此产生了高凝状态；②学者则通过体内实验得出推论,认为是凝血酶原的激活增加促成了高凝状态，而30%、40%稀释度组的各项指标与对照组没有显著性差异,可以推测是在凝血酶原、纤维蛋白原以及血小板的浓度稀释与功能增强之间达到了一种动态平衡。当稀释度达到50%,甚至是60%的时候,由于某一种或是多种凝血有效成分的功能增强已不足以代偿其浓度稀释的影响,就会导致凝血功能整体性的下降,进入失代偿期[2]。 3.2 2号试管内血液凝固，是因为血液与试管壁接触，启动了内源性凝血过程。

3.3血液凝固时间3号试管（冰水）>2号试管，酶的活性随着温度的不同而不同，试管置于冰水槽中，降低了血液中凝血酶的活性，从而使凝血过程减慢。

3.4血液凝固时间4号试管（肺组织浸液）号试管<2号试管，肺组织浸液含有丰富的组织因子，织因子FⅢ启动了外源性凝血过程，从而加速了血液凝固过程。

3.5血液凝固时间 5号试管（棉花）<2号试管，血液接触到粗糙的表面，增大了接触面积，促进因子激活，促进内源性凝血，凝血加速。

3.6血液凝固时间6号试管（均匀石蜡）>2 号试管，血液接触到光滑的表面，阻碍凝血因子激活，阻碍内源性凝血，从而使得凝血速度减慢。

3.7血液凝固时间7号试管（草酸钾）>2号试管，原因是草酸钾是抗凝剂与血液中 Ca2+生成草酸钙沉淀，减少了 Ca2+浓度，抑制了凝血过程。 3.8血液凝固时间8号试管(肝素)>2号试管，是因为肝素是抗凝剂，通过增加抗凝血酶的活性而发挥间接抗凝作用，增长了血液凝固时间。主要调节机制：①增强抗凝血酶Ⅲ与凝血酶的亲和力，加速凝血酶的失活；②抑制血小板的粘附、聚集[3]。

3.9经竹签搅拌后的小烧杯中的血液，呈液态，不出现凝固现象；对照组中的血液呈出现凝固。这是因为经搅拌后，粘在竹签上的就是纤维蛋白，之后血液的上清液就是血清，血液不会出现凝固。血液凝固的关键过程是血浆中的纤维蛋白原转变为不溶的纤维蛋白。多聚体纤

维蛋白交织成网，将很多血细胞网罗其中形成血凝块。 3.10本实验是外源性的凝血，是由因子VII与因子II组成复合物，在有Ca2+存在的情况下激活因子X生成Xa。因子III为磷脂蛋白质。Ca2+的作用就是将因子VII与因子X都结合于因子III所提供的磷脂上，以便因子VII催化因子X的有限水解形成Xa，磷脂胶粒(外源性途径由组织凝血活素提供）使活化反应在胶粒表面进行，大大提高反应速度，而Ca2+的作用在于促进酶和底物与磷脂表面的结合[4]。

3.11在凝血过程中，血小板的活化也促进了血液的凝固，凝血因子会在血小板上活化和组装：①因子Ⅸ的血小板依赖性活化：因子Ⅸ激活可通过两条途径 ,主要的一条为组织因子与因子Ⅶa复合物途径 ,其次为血小板表面结合的因子Ⅺa途径。因子Ⅺa二聚体的一个链结合于血小板表面 ,另一个链与因子Ⅸ 结合 ,使之与血小板发生相互作用；②因子Ⅺ的血小板依赖性活化：因子Ⅺ在活化血小板上的结合位点为糖蛋白Ib-V-Ⅸ复合物中的糖蛋白Ibα链 ,凝血酶也与该复合物结合 ,因子Ⅺ与糖蛋白Ib之间的作用则有利于因子Ⅺ被凝血酶裂解成Ⅺa,继而通过因子Ⅸa途径产生大量凝血酶[5]. 4.结论：

血液凝固受接触面、温度、Ca2﹢等理化因素的影响，血液接触面粗糙，能加速血液凝固，而血液接触面光滑，降低温度则使血凝减慢，此外加肝素等抗凝剂，加草酸钾除去血液中的Ca2﹢等可延缓血液凝固。 参考文献

[1]王卓强 徐震 刘秀珍 范里莉.体外不同程度生理盐水稀释血液对凝血功能 的影响[J].解放军医学杂志,2008,33(10):-1268-1271

[2]《机能学实验教程》 陆源，林国华，杨午鸣主编 第二版科学出版社2010.6 [3]朱大年，主编，生理学，第7版，人民卫生出版社，2010.6 P63 ~65 [4]汪学荣 周成兰 血液凝固机理的研究 肉类研究 2005.11

[5]徐士欣 编译 焦连亭 包承鑫 审校 血小板活化与血液凝固 Clin Biochem &Lab Med Foreign Med Sci ,September 2004 ,Vol 25 ,No. 5