灰树花菌种分离技术有哪些?
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发布时间：2022-04-25 05:33
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时间：2023-07-06 18:42
菌种来源一般有两种途径，一是采用组织或孢子分离技术繁殖菌种，二是引进菌种。科研单位一般采用组织分离和孢子分离技术，所分离的菌种须经出菇品比试验，成功后才能推广应用。
（一）组织分离 组织分离属于无性繁殖技术，从理论上讲，所获菌种不会发生遗传重组等变异，因此常被生产上采用。
选择无污染并菇形健壮的幼菇（六分成熟，菌盖背面刚出现菌孔），采摘后及时放入灭过菌的纸袋中带回接种室，连同母种用试管培养基等用品一起放入接种箱内消毒。在接种箱内无菌操作，先用75%的酒精消毒双手和工具，然后从种菇上取生长健壮的分支，用0.1%升汞液消毒种菇表面，然后用消过毒的解剖刀从菌盖中部纵切开，用接种钩钩取小块菌肉，迅速接入培养基斜面的中部，塞好棉塞，在25℃下培养3～5天后即可看到组织块周围长出白色稀疏纤细的菌丝，15～18天菌丝即可长满试管，挑选菌丝健旺无污染的菌管再进行转接扩繁，须经出菇试验合格后用于生产。
（二）孢子分离 这种方法为有性繁殖，所获菌种已经发生遗传重组等变异，生产性状有可能优于母体，也有可能劣于母体。孢子分离有单孢分离和多孢分离两种方法。单孢分离主要用于遗传育种研究，多孢分离多用于生产繁种。孢子分离技术如下：
1.钩悬收集法 收集成熟的子实体（出现菌孔的）菌盖1块，在无菌室经消毒处理后，将菌盖的菌孔朝下悬吊于无菌容器内收集孢子（图3-1），在22～26℃下让其自然弹射孢子5～10小时，容器底部出现白色孢子印。取无菌水，沾取少量孢子制成孢子悬浮液，用灭过菌的注射器或滴管吸取孢子悬浮液，滴1～2滴于试管斜面上，经25℃培养至孢子萌发，挑选无污染的斜面进行扩繁，经严格的出菇试验，择优用于生产。
图3-1 钩悬菇体收集孢子
2.试管收集法 在无菌条件下取一小块灰树花组织，蘸少量无菌琼脂或浆糊，粘附于试管培养基斜面的对面玻壁上（图3-2），加棉塞后在20℃左右静置，菌孔组织中的孢子会弹射到斜面培养基上，再去掉试管壁上的菌块，经进一步培养获得多孢子萌发的菌丝体。
图3-2 试管斜面收集孢子
对于一般的灰树花生产者而言，引种是快捷可靠的办法。不同来源的灰树花菌株，其菌丝生长表现出较大差异，表明它们的遗传性状不同。不同株系不仅有形态差别，在原基形成快慢和产量上也有差异，尤其是原基形成快慢与产量呈正相关，即原基形成越快产量越高。例如河北省迁西县所用的灰树花菌种是该县食用菌研究所选育成功的，较适合仿野生栽培条件，特点是菇形大、色泽深、产率高。
