已知一段基因片段,如何克隆之前的片段,也就是如何克隆已知基因的启动子？启动子一般有多少BP？
发布网友
发布时间：2022-04-26 22:49
共1个回答
热心网友
时间：2023-11-11 02:38
不知道你要克隆什么基因的启动子？
一般而言，如果是与模式生物亲缘关系较近的生物中克隆某基因的启动子，可以查询模式生物该基因的sequence
viewer相关信息，这个在拟南芥数据库以及NCBI中都可以实现。相关操作内容可以参阅本论坛中关于NCBI使用方法的一些帖子。
查到sequence
viewer后，选取该基因5‘UTR上游2000bp的序列作为你的目的序列，然后与你的基因的已知序列（我想，在克隆启动子之前，你应该至少已经有你的目的基因的CDS了吧？）ATG下游序列进行拼接，然后利用你查到的序列设计F引物，利用你已知的目的基因序列设计R引物，再按照常规PCR进行后续试验即可！
对于那些与模式生物亲缘关系较远的生物而言，我建议你在CNKI上输入“启动子克隆”为关键词查一下，你会发现，应该有很多人总结过这方面的技术的！
另外，我这还有几种方法，需要M我
热心网友
时间：2023-11-11 02:38
不知道你要克隆什么基因的启动子？
一般而言，如果是与模式生物亲缘关系较近的生物中克隆某基因的启动子，可以查询模式生物该基因的sequence
viewer相关信息，这个在拟南芥数据库以及NCBI中都可以实现。相关操作内容可以参阅本论坛中关于NCBI使用方法的一些帖子。
查到sequence
viewer后，选取该基因5‘UTR上游2000bp的序列作为你的目的序列，然后与你的基因的已知序列（我想，在克隆启动子之前，你应该至少已经有你的目的基因的CDS了吧？）ATG下游序列进行拼接，然后利用你查到的序列设计F引物，利用你已知的目的基因序列设计R引物，再按照常规PCR进行后续试验即可！
对于那些与模式生物亲缘关系较远的生物而言，我建议你在CNKI上输入“启动子克隆”为关键词查一下，你会发现，应该有很多人总结过这方面的技术的！
另外，我这还有几种方法，需要M我
